Priprema uzorka iUčitavanje
Zbog upotrebe kontinuiranog puferskog sustava bez slaganja gela u većini slučajeva, uzorci bi trebali imati odgovarajuću koncentraciju i mali volumen. Koristite apipetapolako dodavati uzorak, s 5-10 μg po jažici, kako bi se izbjeglo značajno smanjenje rezolucije. Kadaučitavanje uzorka, napajanje mora biti isključeno. Uzorak treba sadržavati indikatorsku boju (0,025% bromofenol plava ili narančasta) i saharozu (10-15%) ili glicerol (5-10%) kako bi se povećala njegova gustoća, koncentrirao uzorak i spriječila difuzija. Međutim, ponekad saharoza ili glicerol mogu uzrokovati trake u obliku slova U u rezultatima elektroforeze, što se može izbjeći korištenjem 2,5% Ficoll (polivinilpirolidon).
elektroforeza
Napon za elektroforezu je 5-15 V/cm, općenito oko 10 V/cm. Za odvajanje velikih molekula napon bi trebao biti manji, obično ne veći od 5 V/cm.
Bojenje
Fluorescentna boja etidijev bromid (EB) obično se koristi za bojenje za promatranje DNK traka u agaroznom gelu. EB se može umetnuti između parova baza DNA molekula, uzrokujući da se EB veže s DNA. Apsorpcija ultraljubičastog svjetla od 260 nm od strane DNA prenosi se na EB, a vezani EB emitira fluorescenciju na 590 nm u crveno-narančastom području spektra vidljive svjetlosti. Bojanje gela u otopini MgSO4 od 1 mmol/L tijekom 1 sata može smanjiti pozadinsku fluorescenciju uzrokovanu nevezanim EB-om, olakšavajući detekciju malih količina DNA.
EB boja ima nekoliko prednosti: jednostavna je za korištenje, ne razbija nukleinske kiseline, ima visoku osjetljivost i može obojiti i DNA i RNA. EB se može dodati uzorku i pratiti pomoću UV apsorpcije u bilo kojem trenutku. Nakon bojenja, EB se može ukloniti ekstrakcijom n-butanolom.
Međutim, EB boja je moćan mutagen i tijekom rukovanja treba poduzeti mjere opreza, poput nošenja polietilenskih rukavica. Akridin narančasta također je često korištena boja jer može razlikovati jednolančane i dvolančane nukleinske kiseline (DNA, RNA). Pokazuje zelenu fluorescenciju (530 nm) za dvolančane nukleinske kiseline i crvenu fluorescenciju (640 nm) za jednolančane nukleinske kiseline. Dodatno, druge boje kao što su metilen plava, metilen zelena i kinolin B mogu se koristiti za bojenje.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) specijalizirana je za proizvodnju instrumenata za elektroforezu više od 50 godina s vlastitim profesionalnim tehničkim timom i centrom za istraživanje i razvoj. Imamo pouzdanu i cjelovitu proizvodnu liniju od projektiranja do pregleda, skladišta, kao i marketinšku podršku. Naši glavni proizvodi su ćelija za elektroforezu (spremnik/komora), napajanje za elektroforezu, plavi LED transiluminator, UV transiluminator, gel slika i sustav analize itd.
Sada tražimo partnere, dobrodošli su i OEM spremnici za elektroforezu i distributeri.
Ako imate bilo kakav plan za kupnju naših proizvoda, slobodno nas kontaktirajte. Možete nam poslati poruku na email[e-mail zaštićen]ili[e-mail zaštićen], ili nas nazovite na +86 15810650221 ili dodajte Whatsapp +86 15810650221, ili Wechat: 15810650221.
Skenirajte QR kod za dodavanje na Whatsapp ili WeChat.
Vrijeme objave: 20. prosinca 2023