Gel elektroforeza je jedna od glavnih metoda koja se koristi u molekularnoj biologiji za analizu DNK. Ova metoda uključuje migraciju fragmenata DNK kroz gel, gdje se odvajaju na temelju veličine ili oblika. Međutim, jeste li ikada naišli na bilo kakve pogreške tijekom pokusa elektroforeze, kao što su razmazane trake na agaroznom gelu ili nikakve trake na gelu? Što bi mogao biti uzrok ovih grešaka?
Naši tehničari ovdje su saželi nekoliko rješenja problema za vašu referencu.
1. Razmazane trake na agaroznom gelu
●DNK je degradirana. Izbjegavajte kontaminaciju nukleazom.
● Pufer za elektroforezu nije svjež. Nakon višekratne uporabe pufera za elektroforezu, ionska jakost opada, a njegova pH vrijednost raste, pa kapacitet pufera slabi, što utječe na učinak elektroforeze. Preporuča se česta zamjena pufera za elektroforezu.
● Korišteni su neodgovarajući uvjeti elektroforeze. Nemojte dopustiti da napon prijeđe 20 V/cm i održavajte temperaturu <30°C tijekom elektroforeze. Za elektroforezu s ogromnim lancem DNA temperatura bi trebala biti <15° C. Provjerite ima li pufer za elektroforezu dovoljan kapacitet pufera.
● U gel je uneseno previše DNK. Smanjite količinu DNK.
● Previše soli u DNK. Koristite taloženje etanolom za uklanjanje viška soli u naprednoj fazi.
● DNK je bio kontaminiran proteinom. Upotrijebite ekstrakcije fenola za uklanjanje proteina u naprednoj fazi.
● DNK je denaturirana. Nemojte zagrijavati prije elektroforeze. Razrijedite DNA u puferu s 20 mM NaCl.
2. Anomalije migracije vrpci DNK
● Renaturacija COS mjesta λHind III fragmenta. Zagrijte DNK 5 minuta ispod 65°C prije elektroforeze, a zatim je ohladite na ledu 5 minuta.
● Korišteni su neodgovarajući uvjeti elektroforeze. Nemojte dopustiti da napon prijeđe 20 V/cm i održavajte temperaturu <30°C tijekom elektroforeze. Provjerite ima li pufer za elektroforezu dovoljan kapacitet pufera.
● DNK je denaturirana. Nemojte zagrijavati prije elektroforeze. Razrijedite DNA u puferu s 20 mM NaCl.
3. Blijede DNK trake ili ih nema na agaroznom gelu
● Nije bilo dovoljne količine ili koncentracije DNK nanesene na gel. Povećajte količinu DNK. Elektroforeza u poliakrilamidnom gelu nešto je osjetljivija od elektroforeze u agarozi, a punjenje uzorka može se odgovarajuće smanjiti.
● DNK je degradirana. Izbjegavajte kontaminaciju nukleazom.
● DNK je obavljena elektroforezom s gela. Gel podvrgavajte elektroforezi kraće vrijeme, upotrijebite niži napon ili upotrijebite gel s višim postotkom.
● Za vizualizaciju DNK obojene etidijevim bromidom korišten je neodgovarajući W izvor svjetla. Koristite svjetlo kratke valne duljine (254 nm) W za veću osjetljivost.
4. Nedostaju DNK trake
●DNK male veličine očišćena je elektroforezom s gela. Gel podvrgavajte elektroforezi kraće vrijeme, upotrijebite niži napon ili upotrijebite gel s višim postotkom.
● Teško je razlikovati DNA trake sličnih molekula. Povećajte vrijeme elektroforeze i provjerite koncentracijugela kako biste osigurali točan postotak gela koji treba iskoristiti.
● DNK je denaturirana. Nemojte zagrijavati prije elektroforeze. Razrijedite DNA u puferu s 20 mM NaCl.
● Lanci DNK su ogromni, a konvencionalna gel elektroforeza nije prikladna. Analizirati pulsnom gel elektroforezom.Koje ste još probleme imali s elektroforezom u agaroznom gelu? Istraživat ćemo više za vodiče u budućnosti.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) je specijalizirana tvrtka koja se fokusira na proizvode povezane s elektroforezom u Kini. Njegova priča počinje 1970. godine kada Kina još nije ušla u reformu i vrijeme otvaranja. Kroz godine razvoja, Liuyi Bitotech ima vlastiti brend, koji je na domaćem tržištu proizvoda za elektroforezu poznat kao Liuyi Brand.
Marka Liuyi ima više od 50 godina povijesti u Kini i tvrtka može ponuditi stabilne i visokokvalitetne proizvode diljem svijeta. Kroz godine razvoja, vrijedan je vašeg izbora!
Horizontalne ćelije za elektroforezu (spremnici/komore) tvrtke Liuyi Biotech visoke su kvalitete i dobrog izgleda. S različitim veličinama posuda za gel, mogu zadovoljiti vaše različite eksperimentalne zahtjeve. Imamo vlastiti tehnički tim i tvornicu. Od dizajna do proizvodnje, sirovina do ključnih dijelova, možemo kontrolirati cijeli proces. DYCP 31 serija je za DNA elektroforezu, koja je modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, iDYCP-31E. Razlike među njima su u veličini gela i cijeni. Nudimo pune veličine proizvoda za naše kupce. ModelDYCP-32Cmože napraviti najveći gel 250mm*250mm.
U međuvremenu, preporučujemo naše napajanje za elektroforezuDYY-6C,DYY-6DiDYY-10Cza naše ćelije za elektroforezu (spremnici/komore) serije DYCP-31 i 32.
Ako želite više informacija o proizvodima, posjetite ovu web stranicu da biste saznali više i dobrodošli da nas kontaktirate putem e-pošte kako biste nam rekli što želite i vidjeli možemo li vam ponuditi rješenja.
Za više informacija o nama, kontaktirajte nas putem e-pošte[e-mail zaštićen], [e-mail zaštićen].
Vrijeme objave: 9. svibnja 2022